Форум » Общие вопросы » Макро, микро и супермикро… или зачем металловеду электронный микроскоп. » Ответить
Макро, микро и супермикро… или зачем металловеду электронный микроскоп.
SAE: Макро, микро и супермикро… или зачем металловеду электронный микроскоп. Как металловеды используют металлографический микроскоп, вы уже знаете. Об этом было здесь - http://mycoweb.narod.ru/fungi/Informe/Photographing_of_mushroom_spores.html Как приспособить электронный микроскоп для решения своих задач? Прежде всего, нужно выполнение нескольких обязательных условий. Первое – Вы должны сформулировать решаемые задачи. Второе – нужен сам микроскоп. Третье – время и желание владельцев микроскопа тратить это самое время на Вас.
Ответов - 35, стр:
1 2 All
SAE: Итак, вооружаемся объектами для исследований, десятком банок пива и едем в гости в одну замечательную организацию, которую просили нигде не называть… Начнём с того, что у нас была возможность выбора, на каком микроскопе семейства VEGA проводить исследования. Выбрали VEGA II XMU, кроме того, химический анализ нам был не нужен. Следующий необходимый шаг перед откупоркой банок с пивом…? Правильно! Пиво нужно охладить, а биологические объекты, к коим относятся споры (не электропроводные, заметим) нужно металлизовать, чтобы избежать заряда объекта и последующих негативных явлений, таких как появление белых размазанных «хвостов» на изображении, или, что значительно хуже, сдувания лёгкого объекта электронным «ветром». Итак, холодное пиво, металлизованные объекты и электронный микроскоп… Небольшое отступление. Электронно-микроскопические изображения сопровождены фотографиями спор, выполненными на обычном металлографическом микроскопе, и, конечно же, фотографиями самого Его Величества Гриба. В том числе и стерео. Начнём с банальных грибов – хорошо известный всем Подосиновик красный (Leccinum aurantiacum) с гладкими спорами. Действительно, в случае гладкой поверхности спор электронная микроскопия не даёт существенных результатов. Сравните сами оптическую фотографию и ЭМ-изображение. Следующий объект – Дисцина щитовидная (Discina_perlata). Перекрёстная и прямая пары. Гладкая (почти гладкая) поверхность споры, и электронная микроскопия даёт возможность увидеть мельчайшие детали строения поверхности. Однако мы с Вами тут же замечаем существенный недостаток электронной микроскопии – она не даёт возможности заглянуть внутрь объекта и изучить его строение. Псевдоплектания черноватая (Pseudoplectania nigrella). Перекрёстная и прямая пары. Всегда задавался вопросом, что за «глазки» видны на микрофотографии сухих спор Псевдоплектании? Они, кстати, исчезают при размачивании спор. И вот он – ответ! Это «впуклости» или «впячивания» на сферической поверхности споры, что отчётливо передаёт ЭМ-изображение. Ивишень или Огуречный гриб (Clitopilus prunulus). «Семечки» спор, сухие и размоченные. На ЭМ-изображении хорошо видны белые «хвосты», вызванные перезарядкой недостаточно металлизованных объектов.
SAE: Паутинник багряный (Cortinarius purpurascens). Здесь мы видим, что и оптическая и электронная микроскопия хорошо передают характер поверхности спор этого гриба. Однако если на оптической фотографии видно только, что поверхность спор шероховатая, то на ЭМ-изображении отчётливо видны особенности строения поверхности. Кроме того, мы видим и ещё один недостаток электронной микроскопии – она не умеет передавать цвет! Энтолома прекрасная (Entoloma nitidum). Перекрёстная и прямая пары. На микрофотографии хорошо видна характерная угловатая форма энтоломовых спор. Что же нам показывает электронный микроскоп? Неужели это просто скомканные маленькие бумажки? Волоконница звёздчато-споровая (Inocybe asterospora). Не зря этот гриб получил своё имя… Сколько лучей у звёздочек-спор? На ЭМ-изображении детали видны намного лучше, и мы можем без труда подсчитать лучи. Сколько у Вас получилось в среднем на одну спору? Млечник жгуче-млечный (Lactarius pyrogalus). Для млечников (Lactarius), как и для сыроежек (Russula), одним из ключевых признаков их идентификации является количество, форма и взаимное расположение шипов и гребней на поверхности спор. Только, к сожалению, наблюдать эту красоту в оптический микроскоп без иммерсионной жидкости практически не возможно. Другое дело – микроскоп электронный с его высокой разрешающей способностью и глубиной резкости… Другой Млечник – Млечник дубовый (Lactarius quietus). Другой вид млечника, и совершенно иное расположение шипов и гребней на поверхности спор. Наконец - Волнушка белая (Lactarius pubescens). Опять шиповатые споры и их форма – идентификационный признак. Объект был недостаточно металлизован и часть спор просто унесло электронным "ветром". Видите три тёмных пятна? Там только что были споры…
SAE: Рогатик Инвала – (Ramaria invalii). Вытянутые (и прохожие на семечки) шиповатые споры. "Какие красивые бяки" – сказала моя коллега по работе. Телефора кисточковидная – (Thelephora penicillata). Когда я первый раз нашел этот гриб и не знал ещё, как его называют, был приятно удивлён тем, что форма спор до удивления напоминает форму самого гриба. Гриб был старый, и споры у старого гриба получились неказистые. Однако неказистость тут же исчезла, стоило только воспользоваться электронным микроскопом. Планета Маленького принца – решили мы! Опять Телефора кисточковидная, на этот раз посвежее. К слову сказать, найти телефору – непростая задача. Уж очень хорошо она маскируется. Гриб в самом расцвете сил, и споры у него фотогеничные. Опять планета Маленького принца. Зачем ему столько? Траметес жёстковолосисстый – (Trametes hirsuta). Фотографируя споры этого гриба, был убеждён, что часть спор (та, которая выглядит как округлые частицы) располагается вертикально, "втыкаясь" в поверхность стекла. Электронная микроскопия показала, что споры при падении буквально расплющиваются и намертво прилипают к стеклу. Энцелия шелушистая – (Encoelia furfuracea). Аналогичная ситуация со спорами энцелии. Отличие состоит только в том, что к стеклу в основном приклеиваются комки (конгломераты) спор, покрытые довольно толстым слоем слизи. "Краковские колбаски в желе". При металлизации такого конгломерата получается малоконтрастная картинка, потому что тонким слоем золота покрывается поверхность и спор и "желе", в котором они плавают. Попадаются и одиночные споры.
SAE: Лензитес березовый – (Lenzites betulina). Попытка получить изображение спор на базидиях закончилась блестящим подтверждением тезиса о том, что ВСЁ в грибах состоит из гиф. А что споры?.. А споры все улетели-высыпались. Пикнопорус киноварный – (Pycnoporus_cinnabarinus). "Гифы грибов способны тесно переплетаться, образуя ложную ткань – плектенхиму". Напоследок – несколько историй из мира грибов и примкнувших. Дедалеопсис трёхцветный – (Dedaleopsis_tricolor). Перекрёстная и прямая пары. Каким ветром в гименофор гриба занесло чешуйки с крыла бабочки? Наверное, мы это никогда не узнаем. Чешуек было много. Но, к сожалению, почти все они были унесены "ветром" (электронным). Осталась только одна неказистая. Неопознанная жёлтая сыроежка – (Russula sp). Грибной клещ Пигмефорус (Pygmephorous). Зачем он здесь? Кстати, споры сыроежки ему, по-моему, как раз "по зубам". Принимаются любые критические и конструктивные высказывания.
Grey: SAE ААААААААААААффигеть!!!!!!! ТАКОГО наверное еще никто не делал! Слов нет! Спасибо ОГРОМНЕЙШЕЕ! Такой позитив с утра!
coloboc: А почему не в виде статьи на сайт?
Grey: SAE Да, это должен увидеть мир! Обязательно статью на сайт!
ZAE: SAE Сказать впечатляет - ничего не сказать. Ошеломляет и потрясает! Микологам, да и не только, при взгляде на подобные сканы спор гарантировано обильное слюноотделение.
theria: SAE Есть к чему стремиться Не удивлюсь, если скоро здесь увижу грибные ДНК штрих-коды.
jmette: SAE Тут даже смайлики не oчень пoмoгают. Слoв нет. Огрoмнoе Вам спасибo, Андрей! Эту рабoту (и вoзмoжные ее расширения?) надo публикoвать и в виде статьи, абсoлютнo сoгласен с coloboc ! А передo мнoй - oчередная, приятная задача: Перевoдить эту штуку и oтдать друзям на чтение...
Kessler: SAE Да, впечатляет. Вот что интересно: "шипы" на спорах. Это по типу репейниковых "ёжиков", чтоб лучше цепляться? Мало того, что споры почти невесомы, да ещё есть возможность прицепиться и... перекочевать на другой континент!
Галина Ив.: Андрей, ошеломляюще замечательная работа! Действительно, не хватает слов... Однозначно, такой материал требует статейного статуса.
kut: SAE, фантастика!
TVS: SAE Вот это прорыв!!!
vstepanov: SAE Андрей, если надумаете публиковать на сайте - самый зеленый свет такому шикарному материалу я гарантирую. Даже от рыбалки на пару-тройку дней отвлекусь ради такого шедевра.
Юрий С.: Андрей! А-бал-деть! Обязательно "отчет"на сайте! (Что значит, "если надумаете"???), подработать -и на сайт! Да, с таким микроскопом можно работать...
ariona: SAE 1. Жаль, что я не металловед 2. Жаль, что не могу выполнить 1 и 3 обязательные условия в связи с отсутствием 2 3. Прими восхищение твоей неиссякаемой энергией, жаль, что у меня нет сотой доли таковой. Мне еще вот что кажется. При опубликовании на сайте(нет сомнений, спасибо Вячеславу!) нужно в каждую твою статью отсюда дать ссылки на соответствующие описания на сайте, а что еще лучше - в каждом описании иметь эти фото в полном объеме! Андрей, ты поднимаешь сайт, мне кажется, на более высокий уровень. Спасибо!
Stalker: SAE, фантастический материал! Огромное спасибо Вам за Вашу работу! Надеюсь, что Вы будете продолжать работать в этом направлении с обязательным размещением материалов на сайте.
ressaure: Потрясающе, просто слов нет! Целый новый мир! Огромное спасибо!
eugene: SAE Браво!! До чего техника дошла... Я с нашим Цейсом тихо уползаю под лавку SAE пишет: Всегда задавался вопросом, что за «глазки» видны на микрофотографии сухих спор Псевдоплектании На самом деле "глазки" - это газовые пузырьки, которые образуются при обезвоживании цитоплазмы спор (так наз. пузырьки Де Бари). При попадании спор в воду они естественным образом исчезают. А на электронных снимках видны спавшиеся (как сдувшийся мяч) из-за вакуума в котором они находятся споры.
полная версия страницы